制备土壤稀释液方法

1. 准备工具:称量工具、无菌水、玻璃珠、三角瓶、移液管、试管、无菌平板、培养基等。
2. 土壤采集:取适量深层土壤样品,一般10g左右。
3. 土壤悬液制备:将土壤样品放入三角瓶中,加入适量的无菌水(通常是土壤样品重量的9-10倍),并加入玻璃珠,振荡约15-20分钟,使微生物细胞分散。
4. 稀释过程:
- 取出1ml土壤悬液加入装有9ml无菌水的试管中,充分摇匀,得到10^-1稀释液。
- 依次进行十倍梯度稀释,即每次取1ml前一次稀释液加入9ml无菌水中,得到10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9稀释度的土壤溶液。
5. 接种培养:
- 使用无菌吸管吸取相应稀释度的土壤溶液,按照所需的稀释度接种到相应的培养基平板上。
- 细菌通常接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌和霉菌则分别接种于马丁氏培养基和高氏Ⅰ号培养基。
6. 培养:细菌平板在37℃恒温培养1-2天,放线菌在30℃培养2-3天,霉菌在30℃培养3-5天。
7. 计数:通过观察平板上的菌落数量,计算每克土壤中的微生物数量。
8. 纯化:挑取单个菌落,在相应的培养基上进行划线或点种,进行进一步的纯化,直至得到纯培养物。
以上步骤完成后,你就可以得到用于后续实验的土壤稀释液
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